AVALIAÇÃO DO POTENCIAL GENOTÓXICO DA PEÇONHA DE

2.10.07 - Farmacologia / Toxicologia
AVALIAÇÃO DO POTENCIAL GENOTÓXICO DA PEÇONHA DE Lachesis muta SOBRE
LINFÓCITOS HUMANOS
1
2*
3
4
5
Marcus V. C. Trento , Mariana A. Braga , Mateus W. de F. Eleutério , Pedro H. S. César , Lucilene F. Silva ,
6
7
8
Tatiane Silva de Abreu , Daniela A. Oliveira , Silvana Marcussi
1, 4, 6 e 7. Mestrando(a) da Universidade Federal de Lavras- UFLA
2* e 5. Doutoranda da Universidade Federal de Lavras- UFLA *[email protected]
3. Estudante de IC da Universidade Federal de Lavras-UFLA
8. Pesquisadora do Depto. de Química, UFLA, Lavras/MG
Palavras Chave: Lachesis muta, cometa, micronúcleo.
200
Introdução
ab
ab
ab
a
a
20
160
a
15
180
a
a
140
120
100
ab
ab
2.
5
ab
80
1.
0
Unidades arbitrarias (0-400)
ab
60
40
20
12
0
50
60
30
40
C+
10
C-
7.
5
0
5.
0
O gênero Lachesis, juntamente com os gêneros
Bothrops, Crotalus e Micrurus são os principais
responsáveis pelos acidentes ofídicos de maior
gravidade no Brasil. Existem poucos estudos com
peçonhas de Lachesis, e nenhum relato de sua ação
sobre moléculas de DNA humano. Assim, objetivou-se
avaliar o potencial genotóxico da peçonha de Lachesis
muta sobre linfócitos humanos usando os testes cometa
(Figura 1) e micronúcleo.
Lachesis muta muta [µg/mL]
Resultados e Discussão
Figura 2. Valores de unidades arbitrárias calculados sobre
porcentagens de nucleóides distribuídos nas classes de
cometa que definem os diferentes níveis de fragmentação.
C+: Doxorubicina (DXR). C-: PBS.
a. difere estatisticamente do controle negativo
b. difere estatisticamente do controle positivo
Foram observados danos nas moléculas de DNA
em todas as concentrações avaliadas, e os dados de
concentrações acima de 10 µg/mL não foram
estatisticamente diferentes da Doxorubicina (12 µg/mL;
C+) (Figura 2). Marcussi et al. (2011; 2013) relataram
maiores porcentagens de danos no DNA para peçonhas
botrópicas e crotálicas quando comparados aos dados
obtidos para L. muta. A composição diferenciada destas
peçonhas poderia explicar o diferente potencial
genotóxico,
considerando
a
uniformidade
das
metodologias utilizadas nos trabalhos mencionados. As
concentrações de 30 e 120 µg/mL resultaram em valores
de unidades arbitrárias três vezes maiores do que os
obtidos para o controle negativo. A presença de
micronúcleos
em
células
binucleadas
indica
fragmentação permanente de moléculas de DNA com
possível transmissão de alterações para as gerações
celulares seguintes, resultantes dos danos. A presença
de micronúcleos nas primeiras gerações após
tratamentos caracteriza potencial genotóxico para o
composto avaliado. As concentrações de peçonha acima
de 5 µg/mL (Figura 3) induziram a formação de
micronúcleos de forma significativa em relação ao
controle positivo.
ab
35
ab
ab
ab
a
30
a
25
a
a
20
ab
15
ab
10
b
5
b
12
0
60
50
40
30
20
15
10
7.
5
C-
5.
0
C+
2.
5
0
1.
0
Figura 1. Esquema da metodologia do teste cometa. (A)
Peçonhas em diferentes concentrações e Doxorubicina (12
µg/mL). (B) etanol P.A por 5 minutos. (C) Iodeto de propídeo
(2mg/mL). (D) microscópio de epifluorescência (400x).
Micronucleo/1000 células binucleadas
40
Lachesis muta muta [µg/mL]
Figura 3. Frequência de micronúcleos em linfócitos
binucleados após tratamento com a peçonha de Lachesis
muta. C+: Cisplatina. C-: PBS.
a. difere estatisticamente do controle negativo
b. difere estatisticamente do controle positivo
Conclusões
A peçonha bruta de L. muta apresentou potencial
genotóxico induzindo danos ao DNA de linfócitos
humanos, com efeito similar ao controle positivo, mesmo
em concentração dez vezes maior.
Agradecimentos
CAPES, FAPEMIG, CNPq e ao Programa de PósGraduação em Agroquímica.
Referêcias
MARCUSSI, S. et al. Genotoxic effect of Bothrops snake venoms and isolated
toxins on human lymphocyte DNA. Toxicon. v.65, p. 9-14, 2013.
MARCUSSI, S. et al. Evaluation of the genotoxicity of Crotalus durissus
terrificus snake venom and its isolated toxins on human lymphocytes.
Mutation Research. v. 724, p. 59-63, 2011.
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68ª Reunião Anual da SBPC