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Genética Bacteriana e
Clonagem
Universidade de Santo Amaro
Faculdade de Biomedicina
Microbiologia Básica e Clínica I
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DNA
Ácido Desoxirribonucleico
É responsável pelo armazenamento e
transmissão da informação biológica
T
A
5`
T
3`
A
DNA
C
A
G
3`
G
Estrutura
Primária
T
C
5`
CROMOSSOMO
 Dupla fita circular
 Tamanho varia de acordo com o tipo de bactéria

Escherichia coli – 4,6 milhões de bases (850 x maior que a
célula)
 Difuso na região nucleóide
 Genes para o metabolismo e ciclo vital
 Constituído por partes codificantes

Ausência de Introns
O cromossomo dos procariontes é
circular
Localização do DNA
Eucariotos x Procariotos
Meio com glicose
(lacL) gene repressor
(lacP) gene promotor
(lacO) gene operador
(lacZ) β-galactosidase
•(lacY)lactose-permease
•(lacA) tiogalactosídeo-transacetilase
Sem glicose e com lactose
Clonagem Molecular
A Bactéria como ferramenta
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Estrutura básica de um plasmídeovetor
Clonagem Molecular
Tecido
RNA
AAAA
AAAA
AACT
GGCA
TCGT
RT
ds cDNA
cDNA
AACT
ds cDNA
GGCA
TCGT
VETORES
ORI
DNA
RECOMBINANTE
ORI
Ampr
PLASMÍDIO
Ampr
cDNA
Seleção das bactérias transformadas
Bactérias que não receberam o DNA (inserto)
crescem formando colônias azuis (presença do
gene LacZ) enquanto aquelas que foram
transformadas crescem incolores.