Orientador/Colaboradores (Arial, 16pt)

Caracterização molecular e capacidade de colonização
de plantas por estirpes do gênero Herbaspirillum
Valéria Mendes Soares, bolsista PIBIC/CNPq
Orientador: Leonardo Cruz Magalhães
Introdução e Objetivos
O gênero Herbaspirillum é composto por 14
espécies descritas e é conhecido por conter
bactérias diazotróficas capazes de assimilar o
nitrogênio atmosférico. A interação destas bactérias
com gramíneas evidencia um grande potencial
biotecnológico para o aumento da produtividade das
culturas. O objetivo deste trabalho consiste na
caracterização molecular e avaliação da capacidade
de colonização de plantas por estirpes do gênero
Herbaspirillum marcadas.
Métodos
▪ Caracterização Molecular – as estirpes foram
submetidas à análise por espectrometria de massa
MALDI-TOF e identificadas por sequenciamento do
gene 16S rRNA.
▪ Transformação bacteriana – as estirpes foram
transformadas pelos métodos de conjugação e
eletroporação para marcação com gene repórter gfp.
▪ Colonização de plantas – testes de colonização
epifítica e endofítica em milho foram realizados com
a espécie Herbaspirillum huttiense.
Referência
▪ BALDANI, J.I.; BALDANI, V.L.D.; SELDIN, L.;
DÖBEREINER, J. Characterization of Herbaspirillum
seropedicae gen. nov., sp. nov., a root-associated
nitrogen-fixing bacterium, 1986.
Resultados e Discussão
▪
Técnica
de
espectrometria de
massa por MALDITOF mostrou-se útil
na identificação e
diferenciação
das
espécies do gênero
Herbaspirillum
(Figura)
FIGURA: Espectros de massa de diferentes
Herbaspirillum analisadas por MALDI-TOF
espécies
de
▪ Todas as estirpes transformadas mostraram-se resistentes ao
antibiótico Tetraciclina, mas não apresentaram fluorescência.
▪ Ensaios de colonização mostraram que a espécie H. huttiense
é capaz de colonizar raízes de milho em níveis iguais aos
encontrados para a espécie controle H. seropedicae.
Conclusões
▪ A espectrometria de massa MALDI-TOF é uma técnica
rápida, barata e confiável para a identificação de espécies do
gênero Herbaspirillum.
▪
A marcação de estirpes é útil para se confirmar a
colonização, principalmente endofítica.
▪ Pela primeira vez foi demonstrada a capacidade da espécie
H. huttiense de colonizar plantas de milho em níveis iguais à
espécie controle.