PRODUÇÃO DE ANTICORPOS IgY ANTI

PRODUÇÃO DE ANTICORPOS IgY ANTI-NP DO VÍRUS SUÍNO H1N1.
Silva, M. C.1*; Damasco, K. F.2; Scarone, M.1; Singi, P. B.1; Nascimento, A. M.3; Schaefer, R.4;
Venancio, E. J.5
1
Aluno de pós-graduação em Patologia Experimental, Universidade Estadual de Londrina,
Paraná, Brasil.
2
Aluna de graduação em Biomedicina, Universidade Norte do Paraná, Paraná, Brasil.
3
Aluna de graduação em Biomedicina, Universidade Estadual de Londrina, Paraná, Brasil.
4
Pesquisadora de Sanidade Animal/ Virologia de Suínos, Empresa Brasileira de Pesquisa
Agropecuária, Santa Catarina, Brasil.
5
Docente do Departamento de Ciências Patológicas, Universidade Estadual de Londrina,
Paraná, Brasil. *e-mail: [email protected]
A influenza ou gripe é uma doença viral zoonótica que representa uma ameaça à saúde, tanto
animal quanto humana. O subtipo H1N1 é o que classicamente infecta os suínos, podendo
também ser encontrado em humanos, equinos e em algumas espécies de aves. A influenza
suína é uma infecção viral que leva a problemas respiratórios. A taxa de mortalidade é baixa,
mas possui uma taxa de morbidade muito elevada. A proteína NP do vírus influenza vem
sendo amplamente utilizada em kits de diagnóstico de rápida detecção como o teste de
imunocromatografia, e testes como ELISA em amostras de animais com suspeita de infecção
viral. Todos esses testes têm como base a produção de anticorpos policlonais em mamíferos.
Contudo, devido a preocupações relacionadas ao bem-estar animal, alternativas a produção de
anticorpos em mamíferos têm sido investigadas. A IgY é uma classe de anticorpos presente
em aves, a qual é transferida para a gema do ovo. Esses anticorpos são de fácil obtenção a
partir da gema de ovo de galinhas poedeiras e tem sido estudada sua utilização para
imunoterapia, imunodiagnóstico e pesquisa. O objetivo deste trabalho foi produzir e extrair
anticorpos IgY anti-NP do vírus H1N1 em galinhas poedeiras. A proteína NP foi fornecida
pela EMBRAPA Suínos e Aves. Foram utilizadas 3 galinhas da linhagem White Leghorn. Os
animais foram imunizados com 20 μg da proteína NP do vírus H1N1. Doses de reforço foram
administradas nos dia 14, 28, 42, 84, 126 e 168 do experimento. Ovos foram coletados após 7
dias da sétima imunização. Os anticorpos IgY presentes na gema foram extraídos por
precipitação com sulfato de amônia. Os níveis de anticorpos obtidos foram determinados
através de ELISA. A especificidade da IgY anti-NP foi verificada através do Western blotting.
Os dados obtidos mostraram que os animais produziram altos níveis de anticorpos específicos
para a proteína NP. Esse resultado será utilizado para o desenvolvimento de um teste de
imunodiagnóstico da infecção do vírus H1N1 em amostras biológicas de suínos.
Palavras-chaves: Anticorpos, IgY, H1N1, influenza.
Suporte financeiro: CAPES
Área de conhecimento: Microbiologia animal